NT-proBNP человека, рекомбинантный

Источник: NT-proBNP экспрессировали в клетках E. coli. Аминокислотная последовательность рекомбинантного NT-proBNP (76 а.к.о.) идентична природному белку. Рекомбинантный NT-proBNP содержит дополнительный остаток метионина на N-конце молекулы. Молекулярная масса рекомбинантного NT-proBNP составляет 8589 Da.
 
Применение: может быть использован в качестве калибратора (стандарта) в диагностических системах для определения концентрации NT-proBNP.
 
Характеристика препарата:

• препарат представляет собой замороженный раствор рекомбинантного белка в фосфатно-солевом буфере (10 мM фосфат калия, pH 7,4, 150 мM NaCl)
• концентрация белка в препарате определена спектрофотометрически
• по данным трис-трицинового ДСН-электрофореза чистота препарата составляет более 95%
• иммунореактивность препарата подтверждена методом сэндвич-иммуноанализа с использованием антител, специфичных к различным участкам молекулы NT-proBNP.

Условия хранения: рекомбинантный NT-proBNP рекомендуется хранить при температуре –70°C. Следует избегать повторных циклов замораживания/оттаивания. После первого размораживания стокового раствора, рекомендуется сделать аликвоты препарата небольшого объема (5 мкл) и хранить при –70°С. Для разведения proBNP рекомендуется использовать буфер, содержащий белок-носитель и (или) детергент (например, 0,05 М Трис-HCl, pH 7,5, 0,15 M NaCl, 0,01% Твин 40, 0,5% бычьего сывороточного альбумина).

NT-proBNP – продукт расщепления прогормона proBNP, предшественника белка BNP (мозгового натрийуретического пептида), который вырабатывается в кардиомиоцитах сердца. Большая часть proBNP образуется в левом желудочке. Расщепление proBNP приводит к образованию С-концевого фрагмента BNP (32 а.к.о., 3466 Да) и N-концевого фрагмента (N-terminal proBNP, NT-proBNP), состоящего из 76 а.к.о. (8457 Да). Оба фрагмента BNP и NT-proBNP выделяются в кровь в одинаковых количествах.

В норме небольшая часть прогормона циркулирует в кровотоке, распадаясь на биологически активный гормон BNP и неактивный N-терминальный proBNP. Достоверно показано, что часть молекул proBNP не расщепляются в кардиомиоцитах и секретируются в кровь вместе с BNP и proBNP. Причем, концентрация proBNP в крови в несколько раз превышает концентрацию активного гормона BNP. При застое жидкости в желудочке и соответствующем растяжении его стенок количество вырабатываемого прогормона, гормона BNP и N-терминального proBNP возрастает. Увеличение их концентрации в крови позволяет повысить выделение натрия и вывести лишнюю жидкость.

Определение NT-proBNP в крови важно для диагностики сердечной недостаточности и других патологий, в том числе не сердечных:

• инфаркта миокарда,
• аритмии,
• болезни клапанов сердца,
• острые коронарные синдромы,
• кардиомиопатии (рестриктивная и гипертрофическая),
• некоторые болезни эндокринной системы,
• нарушения функций почек,
• заболевания легких.

Современные методы количественного определения BNP и NT-proBNP в крови разработаны на основе метода сэндвич-иммуноанализа, который позволяет добиться высокой чувствительности. Это крайне важно, учитывая низкий уровень BNP и NT-proBNP в крови здоровых людей. Чувствительность существующих методов для определения BNP составляет 1-10 пг/мл, NT-proBNP – 5-15 пг/мл.

Многочисленные исследования подтверждают эффективность и целесообразность использования обоих маркеров при обследовании пациентов с сердечной недостаточностью. Однако, стоит отметить, что несмотря на высокую чувствительность, BNP и NT-proBNP обладают низкой специфичностью при определении сердечной недостаточности, так как концентрация обоих маркеров может повышаться при других заболеваниях. В связи с этим, измерение уровня мозговых натрийуретических пептидов проводят в рамках первичной диагностики не для установления диагноза сердечной недостаточности, а для ее исключения у пациентов с выраженными симптомами.

В настоящее время измерение концентрации BNP (NT-proBNP) наряду с клиническим обследованием, эхокардиографией, электрокардиографией и рентгенографией грудной клетки рекомендовано Европейским обществом кардиологов для использования при диагностике сердечной недостаточности и дисфункции левого желудочка сердца.