Прокальцитонин

Описание и использование прокальцитонина

Прокальцитонин (ПКТ) представляет собой небольшой белок, состоящий из 116 аминокислотных остатков и имеющий молекулярную массу около 13 кДа. Аминокислотная последовательность ПКТ была впервые описана исследователями Муллек и соавторами в 1984 году. ПКТ принадлежит к семейству родственных белков, в которое входят связанные с геном кальцитонина пептиды I и II, амилин, адреномодулин и кальцитонин. Как и другие пептиды указанного семейства, ПКТ выделяется из молекулы-предшественника — пре-прокальцитонина, состоящей из 141 аминокислотных остатков, путем удаления 25 аминокислотных остатков с N-конца молекулы.

В 1993 году было зафиксировано повышенное содержание ПКТ у пациентов, страдающих системными инфекциями бактериального происхождения, в связи с чем в настоящее время ПКТ рассматривается в качестве основного маркера нарушений, сопровождающихся системным воспалением и сепсисом. Диагностическая ценность ПКТ заключается в наличии тесной взаимосвязи между концентрацией ПКТ и тяжестью воспаления. Было установлено, что «воспалительный» ПКТ не вырабатывается в C-клетках. Предположительно источником ПКТ при воспалении являются клетки нейроэндокринного происхождения.

В некоторых случаях повышение концентрации ПКТ может быть вызвано факторами, не связанными с образованием сепсиса и инфекции. Хирургическое вмешательство, политравмы, тепловой шок, ожоги и кардиогенный шок также могут привести к увеличению уровня содержания ПКТ. Механизм повышения концентрации ПКТ в указанных случаях на сегодняшний день четко не установлен. Многочисленные проведенные исследования указывают на важность мониторинга изменений концентрации ПКТ после кардиохирургического вмешательства или трансплантации сердца в целях определения случаев острого отторжения трансплантата под воздействием бактериальных или грибковых инфекций.

Таким образом, ПКТ имеет высокую диагностическую ценность, а целесообразность определения его концентрации в крови пациентов с использованием специфичных моноклональных антител представляется весьма перспективной и совершенно очевидной.

Строение прокальцитонина, кальцитонина и катакальцина

Как правило, ПКТ вырабатывается в С-клетках щитовидной железы. В результате нескольких последовательных расщеплений образуются три молекулы: N-концевой фрагмент (N-концевой ПКТ, 57 аминокислотных остатков), кальцитонин (32 аминокислотных остатка) и катакальцин (21 аминокислотный остаток) (рис. 1).

Структура прокальцитонина

Рис. 1. Аминокислотная последовательность прокальцитонина. 1 — сигнальный пептид (25 а.к.о.); 2 — N-концевой фрагмент (N-терминальный ПКТ, 57 а.к.о.); 3 — кальцитонин (32 а.к.о.); 4 — катакальцин (21 а.к.о.).

N-концевой фрагмент прокальцитонина (PCT) представляет собой пептид, содержащий 57 аминокислотных остатков. Моноклональные антитела, специфичные к N-концевому фрагменту ПКТ, рекомендуются к применению для иммунологического обнаружения ПКТ в сочетании с антителами, специфичными к кальцитонину или катакальцину. Специфичные к N-концевому фрагменту ПКТ антитела могут с высокой эффективностью применяться в качестве захватывающих антител при проведении исследований сэндвич-методом.

Кальцитонин  — продукт ферментативного расщепления прокальцитонина, представляет собой пептид, состоящий из 32 аминокислотных остатков, молекулярная масса которого составляет около 3,4 кДа, теоретическая pI 6,72. Кальцитонин является гормоном, принимающим участие в метаболизме кальция и фосфора.

Катакальцин представляет собой С-концевую часть молекулы прокальцитонина, состоящую из 21 аминокислотного остатка, молекулярная масса которой составляет около 2,4 кДа, теоретическая pI5,26.Физиологическая роль катакальцина неизвестна.

Моноклональные антитела к прокальцитонину компании Биалекса

Компания Биалекса предлагает моноклональные антитела, обладающие высокой специфичностью к различным эпитопам молекулы кальцитонина: к N-концевому фрагменту ПКТ, кальцитонину и катакальцину. Пары моноклональных антител, специфичных к различным частям молекулы ПКТ, могут использоваться для обнаружения необработанных или частично обработанных молекул ПКТ. Специфичность антител показана на рис. 2.

Эпитопная специфичность МАТ к прокальцитонину

Рис. 2. Эпитопная специфичность моноклональных антител компании Биалекса к прокальцитонину.

Наиболее высокие показатели чувствительности при проведении иммунологических исследований для обнаружения ПКТ в образцах крови пациента были достигнуты с использованием следующей пары моноклональных антител компании Биалекса: CB5 (кальцитонин-специфичное, подложка) и 4PC2 (N-концевой ПКТ, детекторное антитело). Тем не менее, в целях обнаружения ПКТ при проведении иммунологических исследований сэндвич-методом также могут использоваться некоторые другие комбинации моноклональных антител (рис.3).


Рис. 3. Пары антител, рекомендованные для определения прокальцитонина в сэндвич ИФА

Антитела прошли испытания, направленные на определение их способности к обнаружению ПКТ при помощи метода Вестерн-блоттинга. Все моноклональные антитела способны обнаруживать ПКТ при проведении блоттинга после ДСН-электрофореза в восстанавливающих условиях.

Антитела к катакальцину могут использоваться для специфичного и сенситивного обнаружения ПКТ в крови человека. Использование антител к катакальцину рекомендуется главным образом в качестве захватывающих антител при проведении ПКТ иммунологических исследований.

Моноклональные антитела к прокальцитонину

Моноклональные антитела к кальцитонину

Рекомбинантный прокальцитонин человека



← Назад к списку статей


Техподдержка